HaCaT細(xi)胞，人永生化表(biao)皮細(xi)胞形態(tai)

產品名稱：HaCaT細(xi)胞

中文名稱(cheng)：人永生(sheng)化表(biao)皮(pi)細胞(bao)

來源：人皮膚

類別：類屬于(yu)正常(chang)細胞

細胞(bao)形態：上皮(pi)樣

生(sheng)長狀態：貼(tie)壁生(sheng)長

培養基：DMEM 90%, Fetal Bovine Serum 10%

培養條(tiao)件：37℃，5% CO2

消化條件：0.25% (w/v) Trypsin-0.03%(w/v) EDTA 溶液(ye)，消化 5-10min

主營細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)：DC2.4細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)，HOS細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)，3D4/21細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)，HCAEC細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)，Tca-8113細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)，NCI-H460細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)，MCF-7細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)，U251細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)

消化比例：1：4-1：10

換(huan)(huan)液(ye)時(shi)間：2-3 天換(huan)(huan)液(ye)一次

凍(dong)存(cun)液比(bi)例：85%培養基，10%FBS，5% (v/v) DMSO

凍存密(mi)度(du)：1-3 ×10^6/管，液(ye)氮保存

主營細胞(bao)(bao)：CNE細胞(bao)(bao)，MADB-106細胞(bao)(bao)，Sf9細胞(bao)(bao)，HOC細胞(bao)(bao)，3T3-L1細胞(bao)(bao)，THP-1細胞(bao)(bao)。

若客戶收到2ml小管HaCaT細胞，人永生化表皮細胞形態

收(shou)到(dao)細胞以后，用(yong)75%酒精(jing)噴灑(sa)整個管子消毒后放到(dao)超菌(jun)臺內，嚴(yan)格無菌(jun)操作；然后將小管細胞轉移至(zhi)T25培養(yang)(yang)瓶，加(jia)入5ml左右含FBS的培養(yang)(yang)基混勻，放入培養(yang)(yang)箱隔夜培養(yang)(yang)后查(cha)看細胞匯(hui)(hui)合(he)度(du)：若(ruo)未超過(guo)80%匯(hui)(hui)合(he)度(du)，換(huan)液繼續培養(yang)(yang)，根據情(qing)況(kuang)傳代(dai)或者凍存(cun)。若(ruo)超過(guo)80%匯(hui)(hui)合(he)度(du)，可直(zhi)接進行傳代(dai)（細胞貼(tie)壁處理方(fang)法）。

1、細胞(bao)在培(pei)養(yang)(yang)瓶中(zhong)培(pei)養(yang)(yang)至(zhi)良好狀態后(hou)灌滿*培(pei)養(yang)(yang)液并封好瓶口是細胞(bao)運(yun)輸的(de)辦(ban)法(fa)。從細胞(bao)資(zi)源中(zhong)心獲(huo)得細胞(bao)回(hui)到自(zi)己(ji)的(de)實驗(yan)室后(hou)，先打開外包裝(zhuang)，用75%酒精噴灑整(zheng)個瓶消毒后(hou)放(fang)到超凈臺內，嚴格無菌(jun)操作。

2、鏡(jing)下觀察：將(jiang)瓶(ping)(ping)裝的*培養液移(yi)入無菌瓶(ping)(ping)中，留待(dai)日后培養用(yong)，原瓶(ping)(ping)（T25瓶(ping)(ping)）保留6-8ml*培養液，放入37℃、5%CO2孵(fu)箱(xiang)培養；超過80%匯合度時(shi)，按要求比例(li)消化傳代。（收到細胞，建(jian)議棄(qi)去原基培(pei)養，使用新鮮*培(pei)養基培(pei)養）

3、消化(hua)方法：

1、將瓶裝的*培養液移入無菌瓶中，留待日后培養用。加消化液0.25% Trypsin-EDTA (1X), Phenol Red消化。（收到細胞，建議棄去原基培養，使用新鮮*培養基培養）

2、T25瓶加(jia)3ml PBS，洗一次(ci)，棄上清，再加(jia)1ml消化液消化，顯微鏡下觀(guan)察，等細胞*脫離(li)瓶壁分離(li)成單個(ge)后，加(jia)培養基混勻(yun)，離(li)心(xin)收(shou)集，按要求分瓶（視(shi)細胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6， 1:6-1:8），每T25瓶加(jia)培養基至6-8ml，37℃、5%CO2孵(fu)箱培養。

慧穎生物購買HaCaT細胞，人永生化表皮細胞形態注意事項：

1、客戶在收(shou)到細胞時，請首先觀(guan)察培(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)瓶是否完好(hao)，培(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)液是否外滲，培(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)液是否混濁(zhuo)。如發現有瓶破、滲漏、培(pei)養(yang)(yang)(yang)(yang)液混濁(zhuo)等問題，請在收(shou)到細胞后立(li)即與我們(men) 王。

2、由于(yu)運輸過程中(zhong)的(de)問題，細(xi)(xi)(xi)胞培(pei)養瓶(ping)中(zhong)的(de)貼(tie)壁(bi)細(xi)(xi)(xi)胞有可能從瓶(ping)壁(bi)中(zhong)脫(tuo)落下來(lai)，顯微鏡下觀察會(hui)出現細(xi)(xi)(xi)胞懸(xuan)浮的(de)情況，出現此狀(zhuang)態(tai)時(shi)，請(qing)離(li)心收集(ji)，重(zhong)懸(xuan)細(xi)(xi)(xi)胞，置(zhi)培(pei)養箱培(pei)養，細(xi)(xi)(xi)胞會(hui)重(zhong)新貼(tie)附(fu)于(yu)瓶(ping)壁(bi)。如果細(xi)(xi)(xi)胞仍(reng)不能貼(tie)壁(bi)，請(qing)用臺盼藍染色法鑒定細(xi)(xi)(xi)胞活力。

3、收到細胞時(shi)如無異(yi)常(chang)情(qing)況，請按照細胞處理方法處理細胞。