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3t3-l1 3T3-L1細(xi)胞株 中(zhong)文名(ming)稱:小鼠(shu)前脂肪細胞,慧穎細胞庫熱(re)賣細胞株之一(yi),全國各地均可發貨,全國統一(yi)*格(ge)!
3t3-l1 3T3-L1細(xi)胞株 傳代:
吸棄(qi)原培養液
PBS洗一兩次
加入400ul0.125%胰酶(mei)(原代(dai)加0.05% EDTA)消化
轉動培(pei)養盤,保證整(zheng)個盤面都被trypsin液潤(run)過
吸棄trypsin后37度消化(hua)3min-->以*培液(DMEM+10% FCS+1/1000Biotin+1/1000泛(fan)酸鈣-->吸打(槍的吸力調(diao)至zui小),1:10接種(zhong),前(qian)后(hou)左右(you)搖晃培養(yang)盤(pan),細胞均(jun)勻后(hou)放入培養(yang)箱繼續培養(yang)(10%CO2 ,37度(du))
3t3-l1 3T3-L1細胞株 冷凍管(guan)解凍
取出冷(leng)凍管(guan)后, 須立即放(fang)入37 ℃水槽中快(kuai)速解凍, 輕(qing)搖冷凍管使其在1 分鐘內全部融(rong)化, 并注意水面不可(ke)超(chao)過冷凍管蓋沿, 否則易(yi)發生(sheng)污染情形。另(ling)冷凍管(guan)由液氮桶中取(qu)出(chu)解凍時(shi), 必須注意(yi)安(an)全, 預防冷凍管之爆裂。
3t3-l1 3T3-L1細胞株 培養經常出現(xian)的問題
細胞出現脫落(luo)現象,加入誘導液(ye)后,操作一(yi)定(ding)要輕(qing),尤其是加培(pei)養(yang)基,從培(pei)養(yang)板側(ce)壁流下
誘(you)導(dao)分化初期培養(yang)基很容易變(bian)黃,這是正常現象(xiang),若(ruo)擔心過(guo)低(di)的(de)PH值過低損傷細胞,可以(yi)用點(dian)HEPES,或直接多加些培養基(ji)
染上的(de) 也(ye)不(bu)(bu)知道是不(bu)(bu)是脂滴(di),而且很(hen)難看出(chu)細(xi)胞(bao)輪廓,這很(hen)可能是沒有分化成功,與用不(bu)(bu)用染(ran)細(xi)胞(bao)核(he)(he)無關(guan)。不(bu)(bu)染(ran)核(he)(he),單用OIL RED就可顯著看到(dao)(dao)細(xi)胞(bao)(bao)輪廓和脂滴(di)。分化成(cheng)熟(shu)后的脂肪細(xi)胞(bao)(bao),細(xi)胞(bao)(bao)核會被脂滴(di)“擠(ji)”到(dao)(dao)靠近細(xi)胞(bao)(bao)膜的邊緣處。
光(guang)鏡下即可明顯區分(fen)(fen)出分(fen)(fen)化(hua)和未分(fen)(fen)化(hua)的細胞。
3t3-l1 3T3-L1細胞株 來源:慧穎細胞庫
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