人骨(gu)肉瘤(liu)細胞，U-2OS 簡介：

細胞名稱：U-2 OS人骨(gu)肉瘤細胞

性別：女(nv)

組織來源(yuan)：骨(gu)；骨(gu)肉(rou)瘤

細胞(bao)形(xing)態：上皮細胞(bao)

細胞背(bei)景：J. Ponten and E. 這株細胞(原名(ming)2T)源自15歲(sui)女孩的(de)脛骨中等分化的(de)肉瘤。 與WI-38共培養或(huo)CF檢(jian)測(ce)SV40，RSV或(huo)腺病(bing)毒(du)時未檢(jian)測(ce)到病(bing)毒(du)。 1972年發現支原體污染并去除。 在本(ben)庫(ku)(ku)通過支原體檢(jian)測(ce)。 在本(ben)庫(ku)(ku)通過STR檢(jian)測(ce)。

培(pei)養條件：RPMI-1640(GIBCO,貨號31800022, 添加(jia)NaHCO3 1.5g/L, glucose 2.5g/L, Sodium Pyruvate 0.11g/L)，85%；熱滅(mie)活馬(ma)血清，10%；優(you)質胎牛血清，5%。 氣(qi)相：空氣(qi)，95%；二氧化碳，5%。 溫度(du)：37攝氏度(du)。

人骨肉瘤細胞，U-2OS 細胞處理：

1）復蘇細胞(bao)(bao)：將(jiang)含有1mL細胞(bao)(bao)懸(xuan)(xuan)液(ye)(ye)的凍存(cun)管在37℃水浴(yu)中迅速搖晃解(jie)凍，加入4mL培(pei)(pei)養(yang)基混合均勻。在1000RPM條件(jian)下離(li)心(xin)4分鐘，棄(qi)去上清液(ye)(ye)，補(bu)加1-2mL培(pei)(pei)養(yang)基后(hou)吹(chui)勻。然后(hou)將(jiang)所有細胞(bao)(bao)懸(xuan)(xuan)液(ye)(ye)加入培(pei)(pei)養(yang)瓶(ping)中培(pei)(pei)養(yang)隔夜（或將(jiang)細胞(bao)(bao)懸(xuan)(xuan)液(ye)(ye)加入10cm皿中，加入約8ml培(pei)(pei)養(yang)基，培(pei)(pei)養(yang)隔夜）。第(di)二(er)天換液(ye)(ye)并檢查細胞(bao)(bao)密度(du)。

2）細胞傳代(dai)：如果細胞密(mi)度達80%-90%，即可(ke)進行傳代(dai)培養。

對(dui)于貼壁細胞(bao)，傳代可參考(kao)以(yi)下方法：

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗(xi)細胞(bao)1-2次(ci)。

2. 加(jia)(jia)2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分(fen)鐘，然后(hou)在顯微鏡下觀察細胞消化情況(kuang)，若細胞大部分(fen)變圓并脫落，迅速拿回操(cao)作臺，輕敲幾下培養瓶后(hou)加(jia)(jia)少量培養基終止消化。

3. 按6-8ml/瓶補(bu)加培(pei)養(yang)基，輕(qing)輕(qing)打勻(yun)(yun)后吸出，在1000RPM條(tiao)件下(xia)離心4分鐘，棄去上清(qing)液(ye)，補(bu)加1-2mL培(pei)養(yang)液(ye)后吹勻(yun)(yun)。

4. 將(jiang)細胞懸液按1：2到(dao)1：5的(de)比例分到(dao)新的(de)含8ml培養(yang)基的(de)新皿中(zhong)或者瓶中(zhong)。

3）細胞(bao)凍存(cun)(cun)：待細胞(bao)生(sheng)長狀態良好時(shi)(shi)，可進行細胞(bao)凍存(cun)(cun)。貼(tie)壁細胞(bao)凍存(cun)(cun)時(shi)(shi)，棄(qi)去培養基后(hou)加(jia)入(ru)少量(liang)胰酶，細胞(bao)變圓脫落后(hou)，加(jia)入(ru)約1ml含血清的(de)培養基后(hou)加(jia)入(ru)凍存(cun)(cun)管中，再添(tian)加(jia)10%DMSO后(hou)進行凍存(cun)(cun)。

注意事項：

1)收(shou)到細(xi)胞(bao)后，若發現干冰(bing)已揮發干凈、凍存(cun)管瓶蓋脫落、破損及細(xi)胞(bao)有污染，請立即與我們。

2) 所有動物細胞均視為有潛在(zai)的生物危害性，必(bi)須(xu)在(zai)二級生物安全臺內操作，并(bing)請注(zhu)意防護，所有廢(fei)液及接觸過此(ci)細胞的器(qi)皿(min)需要滅菌后方(fang)能丟棄。

相關主要細胞株(zhu)細胞系：

產品名稱(cheng)    簡稱(cheng)    分類(lei)   

人骨(gu)肉(rou)瘤細胞    HOS 骨(gu)，軟骨(gu)，肌肉(rou) 

人骨(gu)肉瘤細胞(bao)    U-2OS   骨(gu)，軟(ruan)骨(gu)，肌肉

人(ren)成骨(gu)肉瘤細(xi)胞  MG-63   骨(gu)，軟骨(gu)，肌肉 

人骨肉瘤細胞    SW1353  骨，軟(ruan)骨，肌肉 

熒光素酶轉(zhuan)染人成骨(gu)肉瘤(liu)細胞  U2OS-LucteT-on  骨(gu)，軟(ruan)骨(gu)，肌肉

人骨(gu)肉瘤細胞    U2OSE6Tet6  骨(gu)，軟骨(gu)，肌肉 

人骨肉瘤細胞    SF-86   骨，軟骨，肌(ji)肉

人成骨(gu)肉瘤細胞(bao)  well2   骨(gu)，軟(ruan)骨(gu)，肌肉 

人成(cheng)骨(gu)肉瘤細胞(bao)  LZJ 骨(gu)，軟骨(gu)，肌肉 

人成(cheng)骨肉瘤細胞  well5   骨，軟骨，肌肉 

人(ren)成(cheng)骨肉(rou)瘤細胞  Saos-2  骨，軟(ruan)骨，肌肉(rou)

小(xiao)鼠骨(gu)肉瘤成(cheng)骨(gu)細胞(bao)  K7M2wt[K7M2-WT] 骨(gu)，軟(ruan)骨(gu)，肌肉 

大鼠骨肉瘤細(xi)胞(bao)  UMR-106 骨，軟骨，肌肉